产品介绍
NcmBlot blocking buffer(快速封闭液)是一种即用型,高效快速应用于 Western Blot 等实验的封闭液。封闭 时间仅需 10 分钟,效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液,获得更高的信号,更低的背景值,信噪 比高。该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分,避免与抗体发生交叉反应,适用于磷酸化的抗体,但不可用 于生物素标记的抗体。
产品特色
Ø 即用型封闭液,无需配制
Ø 封闭时间短,仅需 10 分钟
Ø 背景低,信噪比高,优于常规奶粉等封闭的效果
Ø 不含哺乳动物来源的蛋白,适用于磷酸化的抗体
操作步骤
1. 完成转膜后,将膜移入到平皿或者其他适合的容器中(可以不洗涤膜)。 2. 根据膜的大小,加入适量体积的 NcmBlot Blocking Buffer 封闭液,需完全浸没覆盖膜,对于 7.5x 8cm 的膜推荐使用量 5-10ml。 3. 置于水平摇床上,室温条件下振荡孵育 10 分钟。 4. 取出封闭完成的膜,用洗涤液冲洗蛋白膜 2-3 次,即可用于一抗孵育等后续 western blot 实验。
保存条件
4℃保存,冰袋运输
注意事项
1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为 10 分钟。对于背景低的抗体,可以缩短到 5 分钟,而对于一些背景 非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为 30-60 分钟。 2. 没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验或抗体,可能需要具体情况考虑使 用其它更合适的封闭液,比如奶粉、BSA 等封闭试剂。 3. 信号弱或者无信号:有可能是上样量不足;转膜效率低;抗体效价低,特异性差等原因造成,需要根据实验 情况进行调整 4. 背景高:有可能是抗体使用量过多;蛋白膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被 污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整。 5. 本产品仅限于科研使用,实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。
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