保存条件

该试剂盒应在 2-8℃避光保存，并在有效期（一年）内使用，不得冻存。

使用方法（以石蜡切片染色程序为例）：

1) 将石蜡切片脱蜡至水：先将切片置于二甲苯中 20 分钟，2 次。然后依次在 100%，100%，95%，80%和 60%乙 醇，每级放置 5 分钟。再用蒸馏水浸洗 3 次，每次 3 分钟。 

2) 抗原修复：根据抗原抗体情况，必要时对切片进行抗原热修复：加入柠檬酸修复液（货号：PR30001）或 tris-EDTA 修复液（货号：PR30002）后，将切片放置微波炉，中火修复 2 次，每次加热煮沸后 5 分钟。结束后在修复液中自然冷却。然后用 TBS 冲洗 3 次，每次 1 分钟。 

3) 加入 3%H2O2，室温 10 分钟以灭活内源性过氧化物酶。TBS 冲洗 3 次，每次 1 分钟。 

4) 封闭：用 TBS 制备 5%封闭血清（如无合适血清，可用 PBS（或 TBS）制备 3-5%BSA），室温 1 小时。 注意血清来源种属要与二抗来源种属一致（此试剂盒二抗来源于山羊，需用山羊血清）。 

5) 孵育一抗：滴加适当一抗稀释液稀释一抗（兔或小鼠一抗），室温孵育 1~2 小时或者 4 度过夜孵育。 TBS 冲洗 3 次，每次 1 分钟。 

6) 孵育二抗：滴加 50-100μL 抗兔/小鼠 HRP 标记聚合物，室温孵育 30 分钟，TBS 冲洗 3 次，每次 1 分 钟。 

7) DAB 显色：滴加预制好的显色剂 DAB 工作液 50-100μL，室温孵育 5-10 分钟, 或者镜下控制反应时 间。蒸馏水洗涤。 

8) 苏木素复染 2-3 分钟，然后蒸馏水冲洗。 

9) 各级酒精（60-100%）脱水,每级 5 分钟。取出后置于二甲苯 5 分钟，2 次。用封片胶封片、显微镜观察。

注意

1.在抗原修复及后续免疫组化染色过程中都需避免组织切片干燥，保持湿润； 

2.良好染色效果的获得很大程度上取决于标本制备和正确的实验方法，建议每批实验设置阴阳性对照； 

3.本试剂盒一抗稀释液不能用于 HRP 标记一抗或者二抗的稀释； 

4.DAB 工作液配制好后需避光保存，且最好在 30min 内用完； 

5.本说明书所提供的操作方法仅供参考，如遇特殊情况需要根据实际情况进行调整。

产品应用 ：

DAB 工作液配制：在滴加 DAB 步骤前，将 DAB 原液与 DAB 稀释液按照 1：20 比例配制本次实验所需要的用量，混匀后避光备用。