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【产品简介】

 该试剂盒独特的工作系统可以通过简单操作，快速去除植物组织中的淀粉、 多糖等成分，释放 RNA。适用于植物种子总 RNA 提取， 比如小麦种子、小麦籽粒、水稻种子、芝麻种子、玉米干种子、玉米新鲜种子、豌豆种子、红豆种子、绿豆种子、向日葵种子、西瓜 种子等。使用该试剂盒可以从难于提取的植物样本 中快速获得高纯度、高完整性的总 RNA，可以同时处理大量样品，没有蛋白和基 因组 DNA 的污染。 该试剂盒可以从具有再生能力的块状根茎组织中提取高品质的总 RNA，比如 草菇根部的菌丝、马铃薯的根、 芍药根等组织。

【储存条件】 室温下能稳定保存 12 个月。为达到最佳效果，聚合美建议 S2 溶液保存在 2~8°C。

【注意事项】

 1、首次使用 WB（Washing Buffer 漂洗液)时，请按照瓶身标注（1:3 的比例）加入无水乙醇，混匀并做好标记。

 2、每次提取时在 S1（Solution I）溶液中，加入 1%的β -巯基乙醇，即每 1ml S1 加入 10ul β -巯基乙醇。加过β -巯基乙醇的 S1 溶液请置于 4℃冰箱保存，并在当天用完。β -巯基乙醇每次现用现加效果最好。

 3、S2（Solution II）含有强变性剂，请勿直接于皮肤接触或吞咽，若接触到皮肤或眼睛请尽快到医院处理。实验时务必穿实验服，戴 手套。

 【自备试剂】 氯仿、异丙醇、无水乙醇、β -巯基乙醇

【操作步骤】

 1、将样品转移至用液氮预冷的研钵中，用研杵研磨组织，其间不断加入液氮，直至研磨成粉末状。

 2、每 1ml S1 可处理 20-50mg 组织（小麦、水稻、玉米等常见物种，其他物种可以适当增加组织），将打磨好的样品加入到适量的 S1 （请确认已加 入β -巯基乙醇）中，立即手腕用力上下颠倒至分散均匀，无块状物，13,000g 4℃离心 10min，小心吸取 600ul 上 清液至新的 EP 管中。

 注意：若样品总 RNA 含量比较低，或者期望获得更多的总 RNA 时，最多可以吸取更多上清液，平分至两管，并按比例增加后 续氯仿和异丙醇用量。 例如：加入 S1 离心后，若吸取 800ul 上清液，平分至两管，每管 400ul 上清液应加入 130ul 氯仿，震荡 15s 后，室温孵 育 5min，再离心取上清，每 400ul 上清液加入 240ul 异丙醇。

 3、 加入 600ul S2，颠倒混匀，加入 200ul 氯仿，用力振荡 15s，室温孵育 5min。

 4、 13,000g 4℃离心 10min，小心吸取上清（约 500ul）至新的 1.5EP 管中。

 5、 向上述上清液中加入 300ul 的异丙醇，手腕轻轻的上下颠倒混匀，并全部转移到吸附柱中，13,000g 4℃离心 1min。

 6、 弃废液，内套管中加入 600ul WB（使用前确保已加入无水乙醇)，13,000 rpm 4℃离心 1min。

 7、重复步骤 6。

 8、 弃废液，13,000g 4℃空柱离心 2 min。

 9、 将内套管移入新的 EP 管中，室温静置 2-5 min，使残留乙醇挥发，在膜中央加入 EB（洗脱液）30~200 μl，室温静置 2 min， 13,000 rpm 4℃离心 1 min，获得总 RNA。

 注意：若要获得更多的总 RNA，可以将洗脱下来的 RNA 溶液再重新加到吸附柱的膜中央，室温静置 2 min，13,000 rpm 4℃ 离心 1 min，获得总 RNA。