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基质胶应用一：HUVEC 血管形成

基质胶应用二：皮下成瘤实验

【产品简介】

在体内，基底膜是以细胞为基础的薄层细胞外基质。ABW^® Matrigengel 基底膜基质是一种可溶性的基底膜制剂，这种基质是通过基因编辑技术将多种表达胶原蛋白的基因序列插入到经永生化处理的小鼠子宫肌瘤细胞系中，并在实体肿瘤中抽提出来的。它的主要成分是层粘连蛋白，接着是胶原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白。ABW^® Matrigengel基底膜基质也含有转化生长因子 β、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、成纤维细胞生长因子、组织纤溶酶原激活物和在肿瘤中自然出现的其他生长因子。ABW^® Matrigengel 基底膜基质对正常和变换的锚着依赖性上皮样细胞和其他细胞类型的附着和分化是有效的，这些细胞类型包括神经元、肝细胞、支持细胞、小鸡晶状体上皮细胞和血管内皮细胞等。在成年大鼠肝细胞、血管内皮细胞以及小鼠和人乳腺上皮细胞的三维细胞培养中ABW^® Matrigengel 基底膜基质会影响基因的表达。这是几种类型肿瘤细胞侵袭的基础，支持体内末梢神经再生，并提供体外和体内血管再生研究的必需底物。ABW^® Matrigengel 基底膜基质也支持在免疫抑制小鼠中人类肿瘤的增殖。ABW^® Matrigengel 基底膜基质能用于未分类乳腺细胞的移植，以及分类的上皮细胞亚群嵌入ABW^® Matrigengel 基底膜基质。这一基质也被用作为癌症干细胞模型并被证明在体内能增强肿瘤生长速率。

【产品来源】

经基因编辑的小鼠子宫肌瘤细胞制剂：达尔伯克改良伊格尔培养基和 50 µg/mL 庆大霉素。ABW^® Matrigengel 基底膜基质适合所有的培养基。

【储存方式】

储存在-20℃ 时是稳定的。通过分装并一次性使用分装物来最小化产品的冻融。在-20℃ 冰箱中储存分装物直到准备使用。请勿储存在无霜冰箱中，请保持产品冻结，避免反复冻融。-20℃ 条件下能储存24个月以上。

【推荐应用】

  细胞生长，分化，形态研究，细胞化学功能，细胞迁移/侵袭，细胞基因/蛋白表达。蛋白浓度：8-11 mg/mL。

【重构和使用】

请将装有ABW^® Matrigengel 基底膜基质的小瓶淹没在冰中并放置在 4℃ 冰箱里过夜解冻。解冻后，请涡旋小瓶以确保瓶内材料均匀分散。请全程无菌操作，将解冻的ABW^® Matrigengel基底膜基质放置在无菌区域，在小瓶顶部喷洒70%乙醇并风干，且操作过程需全程在冰上进行。

使用预冷的移液管轻柔的吸取ABW^® Matrigengel 基底膜基质以确保其均匀性。将ABW^® Matrigengel 基底膜基质分装到离心管中，每当ABW^® Matrigengel 基底膜基质堵塞吸头和/或移液管测量不精确时请更换吸头。如果将材料放置在 4℃ 的冰上 24-48 个小时，凝胶化的ABW^® Matrigengel 基底膜基质可能会被重新水化。

ABW^® Matrigengel 基底膜基质可以被用来作薄层凝胶(0.5 mm)，细胞可以接种在其顶部。当作为 1 mm 凝胶层使用时，细胞也可以在ABW^® Matrigengel 基底膜基质的内部培养。过大的稀释比会形成 1 个薄的、非凝胶化的蛋白层，这对于细胞附着有利，但是在分化研究中可能不起作用。

【使用方法】

包被涂层方法：

ABW^® Matrigengel 基底膜基质有多种使用方式。薄层凝胶法适用于在凝胶顶部接种细胞，厚层凝胶法您可以在三维基质内培养细胞，薄层包被法(不凝胶化)为您提供复杂的蛋白质层，您可以在其上培养细胞。无论是细胞生长、附着还是分化，您都可以根据实验需求选择ABW^® Matrigengel 基底膜基质使用方法。

注意：为了维持凝胶化的一致性，我们推荐不要将ABW^® Matrigengel基底膜基质稀释到低于 3 mg/mL。请使用冰冷的无血清培养基来稀释ABW^® Matrigengel 基底膜基质，通过在冰浴移液管吹打或涡旋小瓶进行混合。

一、薄层凝胶法

1. 依照推荐的方法解冻 ABW^® Matrigengel 基底膜基质。使用预冷的移液管，将 ABW^® Matrigengel 基底膜基质混合至均匀。

2. 将培养板放置在冰上，以 50 µL/cm² 向生长表面加入 ABW^® Matrigengel 基底膜基质。

3. 将培养板放置在 37 ℃，30 分钟。

4. 如果有必要的话，请在使用无血清培养基轻柔漂洗前吸出未结合的材料，并确保移液器的吸头不要刮擦包被的表面。完成上述步骤，获得可以使用的培养板。

二、薄层包被法

1. 依照推荐的方法解冻ABW^® Matrigengel基底膜基质。使用预冷的移液管，将ABW^® Matrigengel 基底膜基质混合至均匀。

2. 使用无血清培养基将ABW^® Matrigengel 基底膜基质稀释到需要的浓度。请根据实验需要进行预实验，确定最适包被浓度。

3. 向被包被的容器中加入稀释的ABW^® Matrigengel 基底膜基质。加入的量应该足以容易地覆盖整个生长表面，室温下培养 1 个小时。

4. 吸出未结合的材料并使用无血清培养基轻柔地漂洗。完成上述步骤，获得可以使用的培养板。

三、厚层凝胶法

1. 依照推荐的方法解冻ABW^® Matrigengel 基底膜基质。使用预冷的移液管，将ABW^® Matrigengel 基底膜基质混合至均匀。

2. 将培养板放置在冰上。向ABW^® Matrigengel 基底膜基质中加入细胞并使用预冷的移液管悬浮。以150-200 µL/cm² 向生长表面加入ABW^® Matrigengel 基底膜基质。

3. 将培养板放置在37℃，30分钟后，可以添加培养基了。细胞也可以培养在这一凝胶的顶部。

细胞复苏：

使用细胞复苏溶液在冰上 7 小时内解聚ABW^® Matrigengel 基底膜基质能够实现将生长在ABW^®  Matrigengel 基底膜基质上的细胞最有效地复苏，或者使用中性蛋白酶，考虑到连续培养，中性蛋白酶作为一种金属酶可以分散细胞。

注意事项：

因为温度达到 10℃ 以上时，ABW^® Matrigengel 基底膜基质会开始凝胶化，所以ABW^® Matrigengel 基底膜基质和所有与其接触的培养皿或培养基都应该预冷。本产品需要放置于冰上，并在 2℃-6℃ 的冰箱中或者冷室中过夜融化，蛋白浓度高时可能需要更多时间。操作ABW Matrigel matrix时，我们建议使用预冷的移液管、吸头和管子，并在实验的全部过程中保持ABW^® Matrigengel 基底膜基质处于冰上。

产品使用详情见说明书