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(0.1-1ml) 柱式血液基因组DNA小量提取试剂盒

时间:2023-01-27 11:36:32 浏览:

说明书 下载

【产品简介】

 本试剂盒适用于各种新鲜及抗凝剂(柠檬酸钠、EDTA 等)处理过的全血基因组 DNA 提取。无需去除红细胞,直接裂解 血细胞,DNA 特异吸附到硅胶膜上,通过简单漂洗去除杂质,可快速纯化得到基因组 DNA。使用本试剂盒得到的血液基 因组 DNA 无蛋白、核酸酶污染,可直接进行 PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。


【产品特点】

 1. 适用范围广:可从抗凝血、白膜层和禽类血等样品中直接提取 DNA;

 2. 操作简便:无需有机试剂沉淀,可快速获得高纯度的血液基因组 DNA;

 3. 纯度高:去除污染物和抑制剂彻底,便于下游应用。 


【注意事项】 

 1. 如 Buffer GB 和 Buffer WB1 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解;

 2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降;

 3. 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。 


【操作步骤】 

 1. 在 1.5 ml 灭菌离心管中加入 20 ul Proteinase K,200 ul 鲜血或抗凝血,振荡混匀。 

注意:如要去除 RNA,可加入 4 ul RNase A (100 mg/ml),混匀,静置 5 min 

 2. 加入 200 ul Buffer GB,涡旋混匀 15 sec。

 3. 56℃水浴或金属浴 10 min,期间每隔一段时间震荡离心管,至溶液变得清亮后短暂离心,以去除管盖内壁的液体。

 4. 加入 200 ul 无水乙醇,充分震荡,短暂离心以去除管盖内壁液体。

 5. 将吸附柱放入收集管,将上一步所得溶液全部加入吸附柱中,12,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中滤液。

 6. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer WB1,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。

 注意:Buffer WB1 中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。

 7. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer WB2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。 注意:Buffer WB2 是浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。

 8. 重复步骤 7 一次。

 9. 室温 12,000 rpm 离心 2 min,甩干残留液体。 注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用。

 10. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管中,加入 50 ~ 100 ul Buffer EB,室温放置 2 min。10,000 rpm 离心 2 min,离心管底溶液即血液基因组 DNA。

 注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0 - 8.5 之 间,为了增加基因组 DNA 的回收率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置 2 min,再次离心收集。


货号

规格

销售价

MF061-01

50T

498.00

MF061-04

200T

1498.00