【产品简介】
本试剂盒适用于各种新鲜及抗凝剂(柠檬酸钠、EDTA 等)处理过的全血基因组 DNA 提取。无需去除红细胞,直接裂解 血细胞,DNA 特异吸附到硅胶膜上,通过简单漂洗去除杂质,可快速纯化得到基因组 DNA。使用本试剂盒得到的血液基 因组 DNA 无蛋白、核酸酶污染,可直接进行 PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。
【产品特点】
1. 适用范围广:可从抗凝血、白膜层和禽类血等样品中直接提取 DNA;
2. 操作简便:无需有机试剂沉淀,可快速获得高纯度的血液基因组 DNA;
3. 纯度高:去除污染物和抑制剂彻底,便于下游应用。
【注意事项】
1. 如 Buffer GB 和 Buffer WB1 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解;
2. 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降;
3. 所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作。
【操作步骤】
1. 在 1.5 ml 灭菌离心管中加入 20 ul Proteinase K,200 ul 鲜血或抗凝血,振荡混匀。
注意:如要去除 RNA,可加入 4 ul RNase A (100 mg/ml),混匀,静置 5 min
2. 加入 200 ul Buffer GB,涡旋混匀 15 sec。
3. 56℃水浴或金属浴 10 min,期间每隔一段时间震荡离心管,至溶液变得清亮后短暂离心,以去除管盖内壁的液体。
4. 加入 200 ul 无水乙醇,充分震荡,短暂离心以去除管盖内壁液体。
5. 将吸附柱放入收集管,将上一步所得溶液全部加入吸附柱中,12,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中滤液。
6. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer WB1,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。
注意:Buffer WB1 中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
7. 向吸附柱内加入 500 ul Buffer WB2,室温 12,000 rpm 离心 30 sec,弃收集管中滤液。 注意:Buffer WB2 是浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发。
8. 重复步骤 7 一次。
9. 室温 12,000 rpm 离心 2 min,甩干残留液体。 注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用。
10. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管中,加入 50 ~ 100 ul Buffer EB,室温放置 2 min。10,000 rpm 离心 2 min,离心管底溶液即血液基因组 DNA。
注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0 - 8.5 之 间,为了增加基因组 DNA 的回收率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置 2 min,再次离心收集。
货号 |
规格 |
销售价 |
MF061-01 |
50T |
498.00 |
MF061-04 |
200T |
1498.00 |
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